Gerningsstedets gåde | Rapport
- STX 2.g
- Biologi A
- 10
- 6
- 1407
Gerningsstedets gåde | Rapport
Rapporten er skrevet over et forsøg, som vi kaldte for "Gerningsstedets Gåde". Vi bruger PCR og gelelektroforese til at løse "Gerningsstedets Gåde".
Formål:
Formålet med denne øvelse er at få erfaring med bioteknologiske metoder (PCR og elektroforese) samt at benytte metoderne til at opklare en fiktiv mordsag ved crime scene investigation.
Indhold
Formål
Teori
Materialeliste
- Første del
- Anden del
Fremgangsmåde
- Første del
- Andel del
Resultater
Diskussion
Fejlkilder
Konklusion
Bilag
Uddrag
Fremgangsmåde til "Gerningsstedets Gåde":
Første del:
1. Man starter med at mærke de 5 PCR-rør med hhv. CS, A, B, C og D samt gruppens initialer, så man kan kende dem igen.
2. Rørene stilles på is under hele forberedelsen.
3. Nu overfører man 20 uL DNA fra hvert mikrocentrifugerør til de respektive PCR-rør. Husk at skifte pipettespids hver gang.
4. Derefter overfører man 20 uL mastermix (MMP) til hvert PCR-rør. Man bruger igen pipetten til at blande med.
5. Så stiller man de lukkede PCR-rør i hver sin adaptor, og starter PCR-maskinen.
Andel del:
Elektroforese:
1. Man gør elektroforeseapparatet klar.
2. Man tager de 5 PCR-rør og placere dem i hver deres PCR-adaptor, derefter placerer man dem i skumholderen.
3. Først tilsætter man 10 uL Orange G loading dye til hvert af de 5 rør, så blander man det, ved at suge op og ned med finpipetten.
4. Herefter overfører man 20 uL fra hvert rør til brøndene i gelen.
Rækkefølgen skal være:
• Allel-stige (reference)
• Gerningsstedet
• Mistænkt A
• Mistænkt B
• Mistænkt C
• Mistænkt D
5. Så startes elektroforesen, som kører i 30 min. Ved 100V.
6. Nu flytter man forsigtigt gelen fra elektroforesekarret og over i det kar, man skal bruge til farvning.
7. Så farves gelen og der bruges den langsomme farvning, hvor gelen står natten over... Køb adgang for at læse mere Allerede medlem? Log ind
