TLC - Tyndtlagschromatografi - Bestemmelse af Aminosyre

  • STX 2.g
  • Kemi B
  • 12
  • 6
  • 1602
  • PDF

Rapport: TLC - Tyndtlagschromatografi - Bestemmelse af Aminosyre

Rapporten beskriver en bestemmelse af aminosyre ud fra TLC - Tyndtlagschromatografi.

Formål:
Bestemmelse af ukendt aminosyre ud fra TLC (tyndtlagscromatografi) samt titrering.

Indhold

Formål
Teori
Apparaturfortegnelse
Udførelse
Data
Databehandling
Diskussion, fejlkilder og måleusikkerheder
Konklusion

Uddrag

Udførelse:
Eksperimentet adskilt: en TLC-del og en titreringsdel.

TLC:
Pladen klippes således den passer til karet. Løbevæsken blandes af butan-1-ol, ethansyre og demineraliseret vand i forholdet 60:25:25 (100 mL i alt). Løbevæsken hældes omkring 1 t cm op i karet. I mens er der blevet tegnet med en blød blyant en streg omkring 1,5 cm fra nederste kant. Derudover er der ligeligt fordelt 5 punkter med blyanten. På disse skal de 4 kendte og den 1 ukendte aminosyre påsættes. Omhyggelighed er nøgleordet, idet celluloselaget ikke må beskadiges af blyanten. Kapillærrørene klargøres: opvarmet af gasflammen fra en bundselbrænder, udtrækkes disse. Dette gøres således, at spidsen er mellem 1 og 2 cm lange.
Herpå podes med de 4 kendte aminosyrer og den ukendte – med hver sit kapillærrør. Hver aminosyre påsættes ca. 5 gange hver, adskilt af indtørring.

Til sidst er det kun at placere TLC-pladen med aminosyrene i karet. Låget lægges på, og der ventes til væskefronten er omkring 1 cm fra toppen, da denne ikke må løbe over. Ved dette punkt tages pladen op, og denne tørres. Er man utålmodig kan en føntørrer benyttes.
Efter dette dyppes hele pladen i en ninhydrinopløsning, som fordamper meget hurtigt. Endnu engang skal pladen tørre. Når pletter tydeligt viser sig på pladen er det muligt at se hvordan den ukendte aminosyre løber i forhold til de 4 kendte.

Da det ikke er sikkert at den ukendte aminosyre kun følger én bestemt kendt aminosyre, benyttes titrering med NaOH.
Ved titreringen blandes 10,00 mL aminosyreopløsning med demineraliseret vand til et samlet volumen på 100 mL i et 250 mL's bægerglas. Magneten puttes i, og bægerglasset placeres på magnetomrøreren. pH-meteret klargøres, idet den kalibreres ved brug af en pufferopløsning, hvis pH-værdi er kendt. Efter dette anbringes elektroden i bægerglasset, men vær opmærksom på at den ikke er så tæt på bunden at den kolliderer med magneten. Derefter klargøres buretten, hvor natriumhydroxiden fyldes i, eventuelle lufthuller i buretten fjernes og burettestanden bliver aflæst.

Herpå begynder titreringen. Efter hver tilsætning aflæses pH og burettestand. Det er vigtigt at være nøjagtig og påpasselig, da blot en meget lille tilsætning vil ændre pH-værdien meget omkring ækvivalenspunktet. Derfor: små tilsætninger... Køb adgang for at læse mere

TLC - Tyndtlagschromatografi - Bestemmelse af Aminosyre

[4]
Bedømmelser
  • 06-06-2013
    Givet af 3.g'er på STX
    fiin rapport gode resultater
  • 07-03-2011
    en ok opgave, kan bruges +++
  • 05-05-2013
    Givet af 2.g'er på STX
    Den er rigtig brugbar!!!!
  • 31-10-2012
    Givet af 2.g'er på STX
    fiiiiiiiin opgave :-)

Materialer relateret til TLC - Tyndtlagschromatografi - Bestemmelse af Aminosyre.